Тест Кумбса

Что такое тест Кумбса?

Тест Кумбса используется для выявления антител к эритроцитам (эритроцитам). Для определения антител используется так называемая сыворотка Кумбса, которую получают из сыворотки крови кроликов и сенсибилизируют к человеческим антителам.
Тест используется при гемолитической анемии, несовместимости резус или незадолго до переливания крови. Гемолитическая анемия - это форма анемии, и несовместимость резус описывает несовместимость групп крови.
Существует два различных типа теста Кумбса, прямой и косвенный тест различаются показаниями и выполнением.

Причины теста Кумбса

Прямой тест Кумбса используется при подозрении на гемолитическую анемию. Гемолитическая анемия описывает анемию, при которой клетки крови преждевременно разрушаются из-за повреждения.
При аутоиммунных заболеваниях, таких как системная красная волчанка, ревматоидный артрит или хронический лимфатический лейкоз, образуются антитела, направленные против собственных клеток крови (так называемых эритроцитов). Связывание антител приводит к раннему разрушению клеток крови или к скоплению клеток крови в сосудах. Оба эти фактора приводят к снижению уровня гемоглобина.

Еще одним показанием к прямому тесту Кумбса является болезнь haemolyticus neonatorum, при этом в организме резус-отрицательной матери образуются антитела против резус-фактора. Если еще не родившийся ребенок резус-положительный, антитела материнского ребенка могут попасть в кровообращение плода и инициировать усиленное разложение там клеток крови. Новорожденные отличаются тяжелой формой анемии и желтухи.

Тест Кумбса регулярно используется в медицине переливания крови. Он используется для определения групп крови перед переливанием крови (прикроватный тест), при котором небольшой образец крови смешивается с различными сыворотками из групп крови A, B, AB и 0. Если кровь остается жидкой, значит, кровь пациента соответствует группе крови. Переливание можно проводить.

Непрямой тест Кумбса также можно использовать для поиска свободных антител в организме пациента (тест поиска антител), например во время осмотра беременных, при подготовке к переливанию для онкологических больных или людей, которым уже была перелита кровь.

Узнайте все по теме здесь: Непереносимость резус-фактора.

Подготовка

При подготовке к тесту Кумбса сначала готовят сыворотки с антителами, на которые необходимо провести анализ. Их разливают в разные пробирки или наносят на тестовые карточки.

В повседневной клинической практике, например с прикроватным тестом есть уже подготовленные тестовые карты, которые можно использовать сразу. Далее у пациента берется кровь и готовится к анализу. В зависимости от того, какой тип пробы Кумбса проводится, нужны клетки крови или сыворотка (жидкая часть крови) пациента.

Поток

Если проводится прямой тест Кумбса, эритроциты отфильтровываются из крови пациента. Необходимо проверить, есть ли на них антитела типа IgG, вызывающие гемолитическую анемию или несовместимость групп крови в организме. Сыворотка Кумбса содержит антитела против человеческих антител IgG. Смесь нагревают (выдерживают) длительное время. Если на эритроцитах есть антитела, они слипаются, и тест становится положительным.

Косвенный тест Кумбса состоит из двух частей. Цель состоит в том, чтобы определить антитела, которые свободны в крови и не связаны с клетками крови.
На этот раз жидкая порция (сыворотка) отфильтровывается из крови пациента. Сначала в сыворотку для анализа добавляют эритроциты. Если в сыворотке есть свободные антитела, они будут связываться с эритроцитами. Такой реакции не видно. Только на втором этапе, как и в прямом тесте Кумбса, добавляют и подогревают сыворотку Кумбса с антителами против человеческих антител. Здесь раствор тоже слипается, если результат положительный.

Оценка

Если антитела сочетаются с подходящей сывороткой Кумса, антитела в сыворотке (жидкой части крови) связываются с антителами пациента. Антитела имеют Y-образную форму, что означает, что они всегда могут связывать двух связывающих партнеров и, таким образом, перекрестно связывать эритроциты друг с другом. Создается большое скопление клеток крови. Эти сгустки становятся видимыми - кровь агглютинируется (сгустки) и тест положительный.
Если у пациента нет соответствующих антител, сыворотка остается жидкой. Никаких изменений не видно - тест отрицательный.

Какие есть альтернативы?

Альтернативой тесту Кумбса является иммунологический метод ELISA (иммуноферментный анализ), при котором определенные антитела маркируются ферментом. Это антитело добавляется в тестовый раствор. Если меченые антитела вступают в реакцию с антителами в тестовом растворе, связанный фермент активируется и образует краситель. Соответствующие пробирки меняют цвет - тест положительный.

Помимо процедуры ELISA, существует также WESTERN-блот, который часто используется в качестве подтверждающего теста на положительный результат ELISA.